คำอธิบาย
ข้อมูลจำเพาะ
การใช้งานที่ตั้งใจไว้: ชุดตรวจจับไวรัสของไวรัส bovine ไวรัสแอนติบอดี้ ELISA มีไว้สำหรับการตรวจหาซีรั่มของวัวของไวรัสในซีรั่มของวัวในหลอดทดลอง
ตัวอย่าง: เซรั่ม
วัสดุที่ให้ไว้:
ขั้นตอนการทดสอบและการตีความ
ขั้นตอนที่ 1 ขั้นตอนการทดสอบ
1.1 การเตรียมสารละลายล้าง
Wความเข้มข้นของ orking wของเหลว Ashing:ก่อนการใช้งานการแก้ปัญหาการล้างควรได้รับการกู้คืนไปยังอุณหภูมิห้อง (20-25 องศา) และเขย่าอย่างสม่ำเสมอเพื่อให้มันสม่ำเสมอ จากนั้นเจือจาง 20 เท่าของสารละลายล้างเข้มข้นด้วยน้ำบริสุทธิ์ (ตัวอย่างเช่นสารละลายล้างเข้มข้น 5ml จะถูกเพิ่มลงในน้ำบริสุทธิ์ 95ml) ผสมให้เข้ากันและสามารถเก็บของเหลวที่เจือจางได้ที่ 2-8 องศาเป็นเวลา 7 วัน
1.2 การเตรียมตัวอย่าง
①เลือดสัตว์ทั้งหมดถูกนำไปปั่นเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีและรวบรวม supernatant เซรั่มยังสามารถจับตัวเป็นก้อนตามธรรมชาติโดยไม่ต้องตกเลือด
②เจือจางตัวอย่างซีรั่ม 1:50 (เพิ่มตัวอย่างซีรั่ม 3UL ลงใน 147UL ตัวอย่างเจือจาง) และผสมให้เข้ากัน
หมายเหตุ: การควบคุมเชิงลบและเชิงบวกยังต้องเจือจาง
1.3 การเตรียมเอนไซม์คอนจูเกต
เจือจางเอนไซม์คอนจูเกต 1: 250 (เพิ่ม 2UL เอนไซม์คอนจูเกต (x100) ถึง 498ul ตัวอย่างเจือจาง) และผสมให้เข้ากัน
1.4 ขั้นตอนการทดสอบ
microplate ฉลากเอนไซม์ฉลาก (ตามจำนวนตัวอย่างสามารถถอดประกอบและใช้หลายครั้ง) เพิ่ม 100Ul ของซีรั่มเจือจางลงในไมโครเพลทของเอนไซม์ตั้งค่าสองหลุมแต่ละหลุมสำหรับตัวอย่างเชิงลบและบวก และการควบคุมเชิงบวกต่อปฏิกิริยาที่ดีตามลำดับ เขย่าตัวอย่างเบา ๆ ในบ่อน้ำโดยใช้ฟิล์มแผ่นปิดผนึกเพื่อปกปิดจานและฟักตัวที่ 37 องศาเป็นเวลา 30 นาที
②เปิดฟิล์มแผ่นปิดผนึกสลัดสารละลายในจานให้ดีเพิ่ม 300µl ของการล้างความเข้มข้นของเหลวในการล้างของเหลวในแต่ละหลุมแล้วทิ้งของเหลวในบ่อน้ำ ทำซ้ำขั้นตอนข้างต้น 5 ครั้งและในที่สุดก็แห้งบนกระดาษดูดซับที่สะอาด
③add 100µl ของเอนไซม์คอนจูเกตแต่ละบ่อน้ำครอบคลุมจานและบ่มที่ 37 องศาเป็นเวลา 45 นาที
④เปิดฟิล์มแผ่นปิดผนึกสลัดสารละลายในจานให้ดีเพิ่ม 300µl ของการล้างความเข้มข้นของเหลวในการล้างของเหลวในแต่ละหลุมแล้วทิ้งของเหลวในบ่อน้ำ ทำซ้ำขั้นตอนข้างต้น 5 ครั้งและในที่สุดก็แห้งบนกระดาษดูดซับที่สะอาด
⑤ ADD SUBSTRATE SUBSTRATE ของแต่ละหลุมครอบคลุมแผ่นและฟักเป็นเวลา 10 นาทีที่ 37 องศาจากแสง
⑥ ADD 50µl STOP SOLUTION สำหรับแต่ละหลุมและกำหนดผลลัพธ์ภายใน 5 นาที
ขั้นตอนที่ 2 การตีความผลลัพธ์
ค่า OD450 ของแต่ละหลุมถูกอ่านบนเครื่องอ่าน microplate 96- ดี
2.1 การตรวจสอบความถูกต้อง
ค่าเฉลี่ย OD450Nm ของการควบคุมเชิงลบคือ<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 วิธีการคำนวณ
สำหรับแต่ละตัวอย่างให้คำนวณ S/P ดังต่อไปนี้โดยใช้ตัวอย่างที่แก้ไขและค่าควบคุม:
2.3 การตีความผลลัพธ์
เมื่อ s/p<0.25, it is judged as negative.
เมื่อ S/P มากกว่าหรือเท่ากับ 0. 35 มันจะถูกตัดสินว่าเป็นบวก
เมื่อ 0. 25 น้อยกว่าหรือเท่ากับ s/p<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
ป้ายกำกับยอดนิยม: Bovine ไวรัสท้องร่วงไวรัสแอนติบอดี ELISA ชุด, จีน Bovine ไวรัสโรคท้องร่วงไวรัสแอนติบอดี ELISA KIT ซัพพลายเออร์ผู้ผลิต, โรงงาน, โรงงาน
